尼康將共聚焦成像提高到前所未有的水平

  尼康新的強(qiáng)大的全自動(dòng)共聚焦成像系統(tǒng)，能夠高速高靈敏度地獲得細(xì)胞和分子事件的高質(zhì)量共聚焦圖像。前所未有的新光學(xué)電子技術(shù)創(chuàng)新設(shè)計(jì)使得A1擁有空前的系統(tǒng)質(zhì)量和靈活性，是適用于廣大用戶的理想工具。

 |  概述

 尼康A(chǔ)1共聚焦激光顯微鏡系統(tǒng)通過(guò)新的創(chuàng)造使得共聚焦成像達(dá)到一個(gè)新的質(zhì)量水準(zhǔn)并具有多種功能。全自動(dòng)的A1和高規(guī)格的A1R共2個(gè)型號(hào)可供選擇。A1使用傳統(tǒng)的成對(duì)檢流計(jì)來(lái)獲得高至4096x4096解析度的圖像， A1R引入一個(gè)獨(dú)特的混合掃描器系統(tǒng)提供貞速達(dá)30fps的512x512像素成像。可以便利的在超高速成像時(shí)得到卓絕的圖像質(zhì)量。此外，混合掃描器使得同步光活化和成像成為可能，這些對(duì)于揭示細(xì)胞動(dòng)力學(xué)和相互作用都是至關(guān)重要的。 

 |  獨(dú)特的混合掃描技術(shù)

 ? 420fps的超高速成像

   A1R加入了一個(gè)共振頻率為7.8kHz的共振掃描器來(lái)達(dá)到420 fps (512 x 32像素) 的高速成像。在512X512分辨率下可達(dá)到30fps。并且，共振掃描器視野區(qū)域和檢流計(jì)掃描器視野區(qū)域完全重合，常規(guī)檢流計(jì)掃描器也可達(dá)到10fps（512X512）的速度。尼康獨(dú)創(chuàng)的光學(xué)時(shí)鐘產(chǎn)生方法在最高速度時(shí)也能實(shí)現(xiàn)高的圖像質(zhì)量。其光纖通訊數(shù)據(jù)傳輸系統(tǒng)最高傳輸速度可達(dá)4 Gbit/s。

極高的速度可實(shí)時(shí)觀察血流中細(xì)胞的移動(dòng)（紅色：血管；綠色：細(xì)胞核，120pfs）

 ? 光活化同步高速成像

  高速光活化成像由于非共振掃描器和共振掃描器集成在一個(gè)單元里，不需要另配獨(dú)立的用來(lái)做光活化的激光器，光活化和熒光成像就可以同時(shí)進(jìn)行。擁有可以高速成像的共振掃描器使得光活化后快速變化信號(hào)的獲取成為可能。

光活化釋放組胺而引起細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度發(fā)生變化，上圖顯示Yellow Cameleon 3.60 CFP、YFP兩基團(tuán)發(fā)生FRET現(xiàn)象的過(guò)程（使用457nm激光成像，拍攝速度光活化同步成像速度30pfs）。  

何為混合式掃描頭

  尼康獨(dú)有的混合式掃描頭同時(shí)配備檢流計(jì)與共振式掃描裝置，并允許通過(guò)超高速選擇器靈活轉(zhuǎn)換使用或者同時(shí)使用兩組掃描裝置。

 ? 常規(guī)檢流計(jì)掃描器獲得高分辨率圖像

       檢流計(jì)掃描器單次掃描可獲得高達(dá)4096X4096分辨率。同時(shí)借助新開發(fā)的驅(qū)動(dòng)與采樣系統(tǒng)，及圖像校正科技，可以10pfs（512X512）的速度高速獲取圖像。

四色標(biāo)記斑馬魚圖像（藍(lán)：胞核、綠：瞳孔、黃：神經(jīng)、紅：肌肉）

 |  增強(qiáng)的螢光探測(cè)效率

   掃描頭中的二向色鏡采用平均98%透射率的低角度二向色鏡，熒光強(qiáng)度得到30%的增強(qiáng)。

  同時(shí)采用尼康獨(dú)有的六邊形針孔相對(duì)于傳統(tǒng)的方形針孔熒光采集量可提高30%。

  尼康獨(dú)特的光學(xué)設(shè)計(jì)使成像更明亮。這樣可以使激光曝光強(qiáng)度最小化，減少了細(xì)胞損傷。 

 |  磷砷化鎵（GaAsP）高靈敏度探測(cè)器 

   尼康研發(fā)的磷砷化鎵多通道熒光探測(cè)器配備兩通道GaAsP高靈敏度檢測(cè)器與兩通道普通PMT檢測(cè)器。檢測(cè)波長(zhǎng)范圍達(dá)到400-750nm。

   GaAs PMT的量子效率可提高一倍。遠(yuǎn)優(yōu)于普通PMT。

  GaAsP PMT的靈敏度遠(yuǎn)高于普通PMT，即使是過(guò)去所很難拍攝的弱熒光樣品也可獲得具有極低背景噪聲的高亮度圖像。

 |  獲取明亮清晰圖像的VAAS針孔元件

  尼康開發(fā)了一項(xiàng)稱為虛擬可調(diào)孔徑系統(tǒng)（VAAS）的創(chuàng)新技術(shù)，能在保持圖像亮度的情況下去除模糊。針對(duì)通過(guò)針孔的光和非通過(guò)針孔的光進(jìn)行去卷積，得到更明亮的圖像，從而提高信噪比。

 |  易用的強(qiáng)大功能

  使用NIS-Elements C控制軟件將共聚焦成像系統(tǒng)、顯微鏡及周邊設(shè)備合為一體，并具備簡(jiǎn)單直觀的操作界面。同時(shí)提供可靠全面的后期分析功能。

基礎(chǔ)設(shè)置

光路設(shè)置

   以Ti-E倒置顯微鏡為基礎(chǔ)可將共聚焦系統(tǒng)與N-SIM/N-STORM 超分辨率系統(tǒng)、TIRF系統(tǒng)、光譜檢測(cè)與完美對(duì)焦系統(tǒng)整合提供多模式的成像方案。同時(shí)所有的系統(tǒng)都可在同一NIS-Elements平臺(tái)下完美工作。